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Dernière mise à jour : Mai 2021

4- Mise au point d’une méthode préparative de purification par extraction en phase solide d’un acide gras polyinsaturé à longue chaîne, l’acide docosapentaénoïque

Présentation d'une méthode qui associe différents modes de chromatographie sur colonnes et permet d’obtenir des acides gras polyinsaturés à longue chaîne, en particulier le 22 :5n-6 ou DPA n-6, en quantité adaptée à nos expérimentations sur cultures cellulaires

Auteur(s)

Alain Linard¹, Marie-Sylvie Lallemand¹, Philippe Guesnet¹

Résumé

Nous décrivons une méthode de purification d’un acide gras particulier, l’acide docosapentaénoïque (22:5n-6 ou DPA n-6) sous forme d’ester méthylique, en vue de son utilisation en expérimentation sur cultures de cellules. Les lipides sont extraits à partir de cerveaux de rats déficients en acides gras de la série n-3. Une série de chromatographie sur des petites colonnes de silice à greffon aminopropyl permet une purification d’une classe de phospholipide : la Glycerophosphatidyléthanolamine (GPE) puis, après sa transméthylation, l’obtention d’une fraction d’acides gras riche en acides gras polyinsaturés n-6 sous forme d’esters méthyliques. Ceux-ci sont ensuite purifiés par chromatographie liquide haute performance sur colonne de silice greffée C18. L’association de ces deux modes de chromatographie permet d’obtenir le DPA n-6 avec un taux de pureté de 99,3%.

Mots clefs

Acides gras polyinsaturés, phospholipides, cerveau, colonne de silice aminopropylée, chromatographie liquide haute performance, purification

Documents à télécharger

CT62-ART4_linard-acideGras pdf - 86.53 ko

Date de modification : 28 août 2023 | Date de création : 18 août 2015 | Rédaction : Alain Linard (1), Marie-Sylvie Lallemand (1), Philippe Guesnet (1)